檢測原理
 

　　試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠白細(xì)胞介素 4(IL-4)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白細(xì)胞介素 4(IL-4)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，計(jì)算樣品濃度。
 

　　樣品收集、處理及保存方法
 

　　1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
 

　　2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
 

　　3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
 

　　4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
 

　　5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
 

　　試劑盒性能
 

　　1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
 

　　2.  靈敏度：檢測濃度小于 1.0 pg/mL。
 

　　3.  檢測范圍：5 pg/mL - 160 pg/mL 。
 

　　4.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
 

　　5.  重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
 

　　6.  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
 

　　7.  有效期：6個(gè)月

小鼠白細(xì)胞介素 4(IL-4)ELISA檢測試劑盒的性能