信帆生物：精子核DNA染色液(AO法)使用操作步驟

信帆生物主營(yíng)產(chǎn)品: 質(zhì)控品，干擾物質(zhì)，抗體抗原，elisa試劑盒，動(dòng)物血制品，生化試劑盒等。實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：HE染色/特殊染色/技術(shù)服務(wù)、免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù)、Western blotting實(shí)驗(yàn)服務(wù)、RT-PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),QPCR(熒光定量PCR）、酶聯(lián)免疫ELISA、生化測(cè)試、液相氣相檢測(cè)等。

產(chǎn)品名稱：精子核DNA染色液(AO法)

產(chǎn)品貨號(hào)：XFS0407

規(guī)格：20T

儲(chǔ)存條件：2-8℃，避光

有效期：6個(gè)月

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

正常情況下與精核 DNA 結(jié)合的堿性蛋白(核蛋白)將經(jīng)歷從組蛋白到魚精-蛋白的自然成熟過程，這種成熟后的魚精-蛋白對(duì)精子基因(DNA)具有特殊保護(hù)作用，組蛋白被魚精-蛋白逐漸取代的過程，稱之為精子核蛋白組型轉(zhuǎn)換，這種組型轉(zhuǎn)換具有重要的生理意義。精子核攜帶著全部來自父方的遺傳信息，這些基因必須在受精后才能開始表達(dá)，受精前精子基因在魚精-蛋白的特殊保護(hù)下緊密濃集，無任何 DNA 轉(zhuǎn)錄作用。但當(dāng)核蛋白組型轉(zhuǎn)換異?？梢鹉行圆挥蚺咛ピ缙谪舱哿鳟a(chǎn)，其機(jī)理為：①精子 DNA 不穩(wěn)定且易受損傷而難以受孕；②一旦受精，由于核蛋白組型異常，精子核不能正常解聚，從而影響了雌雄原核的融合；③胚胎不能正常發(fā)育，造成胚胎夭折而流產(chǎn)。

正常精子核約占其頭部的 65％，由結(jié)合蛋白的 DNA 構(gòu)成，精子核DNA 染色液(AO法)作用原理是熒光染料吖啶橙與雙鏈 DNA 結(jié)合發(fā)出綠色熒光，與單鏈DNA 結(jié)合后可發(fā)出紅色或黃色熒光，通常有雙鏈 DNA 的精子才能有受精能力。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

操作簡(jiǎn)要步驟：

1、精液液化后取0.2–0.5 mL，用洗滌液離心清洗1–2次，棄上清；

2、制備精子懸液，取15–100 μL均勻涂片于防脫載玻片，自然干燥；

3、滴加固定液，室溫固定10–15分鐘，蒸餾水輕洗并甩干；

4、配制AO染色工作液（AO染色液:AO Buffer = 1:4），即配即用；

5、滴加染色液，室溫避光染色5分鐘，輕洗后吹干；

6、滴加抗熒光淬滅封片劑，熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。

注意事項(xiàng)：

1. 產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)使用，請(qǐng)勿用于食品、化妝品、臨床醫(yī)療等其它用途。在使用操作中需按臨床標(biāo)本處理，并采取相應(yīng)保護(hù)措施。

2. 使用時(shí)，請(qǐng)穿戴好實(shí)驗(yàn)服、防護(hù)面罩、實(shí)驗(yàn)手套等，實(shí)驗(yàn)防護(hù)，避免直接接觸。

3. 剩余產(chǎn)品請(qǐng)勿隨意丟棄，請(qǐng)按照相關(guān)化學(xué)廢棄物的處理規(guī)定，進(jìn)行處理。

4. 請(qǐng)?jiān)诋a(chǎn)品有效期限前使用。