小鼠孕酮（PROG）ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理

信帆生物主營(yíng)產(chǎn)品: 質(zhì)控樣品，干擾物質(zhì)，抗體抗原，elisa試劑盒，動(dòng)物血制品，生化試劑盒等。實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：HE染色/特殊染色/技術(shù)服務(wù)、免疫組化實(shí)驗(yàn)服務(wù)、Western blotting實(shí)驗(yàn)服務(wù)、RT-PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù),QPCR(熒光定量PCR）、酶聯(lián)免疫ELISA、生化測(cè)試、液相氣相檢測(cè)等。

產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠孕酮（PROG）ELISA檢測(cè)試劑盒

有效期：6個(gè)月

保存條件：2-8℃

用途：本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中小鼠孕酮（PROG）的含量。

【檢驗(yàn)原理】

試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析方法。采用生-物素標(biāo)記PROG，純化的抗PROG抗體包被微孔板，在競(jìng)爭(zhēng)抑制反應(yīng)中，一定量的固相抗體與生-物素標(biāo)記PROG及非標(biāo)記抗原（校準(zhǔn)品或標(biāo)本）進(jìn)行抑制競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)，抗體與生-物素標(biāo)記的PROG結(jié)合量受非標(biāo)記抗原量所抑制，非標(biāo)記抗原量多,抗體與生-物素標(biāo)記的PROG結(jié)合就少，反之結(jié)合就多；反應(yīng)平衡后，形成固相抗體-生-物素化PROG，再加入酶標(biāo)記的親和素，形成固相抗體-生-物素化PROG-酶標(biāo)-親合素復(fù)合物。經(jīng)加底物顯色后，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）。隨著PROG濃度的升高，OD值逐漸下降呈良好的線性關(guān)系。本試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、操作簡(jiǎn)單、快速等特點(diǎn)，對(duì)血清中PROG的減少或升高有可靠的檢出性能。 

【檢驗(yàn)方法】

試劑準(zhǔn)備

1、使用前，所有的組分都要至少?gòu)?fù)溫30min，確保充分復(fù)溫到室溫。

2、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液，會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水，按1:20稀釋?zhuān)?份的濃縮洗滌液，添加19份的蒸餾水。

操作程序

1. 將各種試劑移至室溫平衡兩小時(shí)，取濃縮洗滌液，根據(jù)當(dāng)批檢測(cè)數(shù)量，用蒸餾水1：20稀釋?zhuān)靹蚝髠溆谩?/p>

2. 將預(yù)包被板從密封袋中取出，設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，不加任何液體；每個(gè)校準(zhǔn)品設(shè)2孔，每孔加入對(duì)應(yīng)校準(zhǔn)品50μl；其余每個(gè)檢測(cè)孔直接加待測(cè)血清或質(zhì)控品50μl。

3. 除空白孔外所有孔加入生-物素化抗原50μl，混勻，貼上封板膜，置37℃溫育60分鐘。

4. 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置10秒甩干，重復(fù)3次后拍干。洗板機(jī)洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。

5. 每孔加入酶標(biāo)親合素50μl（空白對(duì)照孔除外），混勻，貼上封板膜，置37℃溫育30分鐘。

6. 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置10秒甩干，重復(fù)3次后拍干。洗板機(jī)洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。

7. 每孔加顯色劑A 50μl，顯色劑B 50μl，振蕩混勻后，置37℃避光顯色15分鐘，每孔加終止液50μl。

8. 用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm，先用空白對(duì)照孔調(diào)零點(diǎn)，然后測(cè)定各孔光密度值（OD值）。