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祝賀浙江中醫(yī)藥大學(xué)訂購我司elisa試劑盒發(fā)表文獻(xiàn)成功

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標(biāo)題《活血康腦顆粒對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用》

摘要:目的探究活血康腦顆粒(黃芪、巴戟天、葛根等)對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。方法建立大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)模型,SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組,模型組,陽性對照組,活血康腦顆粒低、中、高劑量組。測試神經(jīng)功能評分,TTC染色計(jì)算腦梗死體積,酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、6-酮-前列腺素(6-keto-PGFlα)、血栓素B2(TXB2)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α),逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)、細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)表達(dá)水平。為了觀察活血康腦顆粒對血小板聚集功能的影響,全自動(dòng)血凝-分析儀分析凝血時(shí)間,ELISA法測定血漿組織型纖溶酶原激活物(t-PA)和抑制物(PAI)活性,全自動(dòng)-生化分析儀檢測血液流變學(xué)指標(biāo)。

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操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本-稀釋液40μL;

4.  隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。


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