組織細胞總抗氧化能力檢測試劑盒（ABTS法）即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS Method是一種靈敏簡單的檢測總抗氧化能力（Total Antioxidant Capacity，TAOC）的試劑盒。機體中存在多種抗氧化物，包括抗氧化大分子、酶和抗氧化小分子等，可以清除體內(nèi)產(chǎn)生的各種活性氧，以阻止活性氧誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激（Oxidative

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更新時間：2025-02-10

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組織細胞總抗氧化能力檢測試劑盒（ABTS法）

細胞樣品的準(zhǔn)備：收集新鮮細胞(如果是貼壁細胞，請用細胞刮刮下，不宜使用胰酶和EDTA消化)，PBS洗滌細胞一次，離心收集細胞，吸盡上清。加入200μl預(yù)冷的組織細胞裂解液，超聲破碎細胞釋放其中的抗氧化物。4℃，10000g離心10分鐘。取上清用于總抗氧化能力的測定。不立即測定的樣品可以-70℃保存。如果樣品中總抗氧化能力超出測定范圍，可利用組織細胞裂解液適當(dāng)稀釋后測定，稀釋倍數(shù)請通過預(yù)實驗確定。

組織樣品的準(zhǔn)備：取20mg組織，加入400μl的預(yù)冷的組織細胞裂解液，用勻漿器冰浴勻漿。4℃，10000g離心10分鐘。取上清用于總抗氧化能力的測定。不立即測定的樣品可以-70℃保存。如果樣品中總抗氧化能力超出測定范圍，可利用組織細胞裂解液適當(dāng)稀釋后測定，稀釋倍數(shù)請通過預(yù)實驗確定。

總抗氧化能力檢測工作液的配制：按比例混合ABTS溶液和氧化劑溶液，室溫避光放置6小時；然后利用PBS稀釋30-50倍，測定A_734nm，根據(jù)吸光度值調(diào)整稀釋倍數(shù)，至吸光度A_734nm為0.7±0.05，即為總抗氧化能力檢測工作液。

利用標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)制作Trolox抗氧化能力標(biāo)準(zhǔn)曲線，并獲得橫縱坐標(biāo)之間的函數(shù)關(guān)系式，然后利用各樣品的吸光度值計算樣品的總抗氧化能力。對于細胞和組織樣品，可以根據(jù)樣品中蛋白濃度測定，計算每毫克蛋白中總抗氧化能力。

組織細胞總抗氧化能力檢測試劑盒（ABTS法）