尼氏染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

尼氏染色原理：

神經(jīng)元細(xì)胞體包括一個(gè)具有皺褶核膜的大細(xì)胞核、稀疏的染色質(zhì)和一個(gè)明顯的核仁。在細(xì)胞體中細(xì)胞質(zhì)是尼氏顆粒，即能夠代表粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并在很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特異的斑點(diǎn)狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒。尼氏顆粒可以用很多染色來(lái)顯示如中性紅、亞甲基藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時(shí)間使一些染色既可以?xún)H突出尼氏物質(zhì)，也可以顯示神經(jīng)元的細(xì)胞核和神經(jīng)膠質(zhì)。各種神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)都含有尼氏體，但其形狀、數(shù)量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹(shù)突中，但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會(huì)因?yàn)樯頎顟B(tài)的變化而變化，尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)蛋白質(zhì)合成的重要部位，當(dāng)神經(jīng)元受到刺激后，胞體內(nèi)的尼氏體會(huì)明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞甲藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和焦油紫等染料染成紫藍(lán)色。

尼氏染色說(shuō)明：

1、細(xì)胞可做染色，貼壁細(xì)胞做爬片后染色，懸浮細(xì)胞做滴片后染色。

2、拍照倍數(shù)分100倍，200倍，400倍。正常情況下拍照是200倍3張，400倍3張。

3、全景掃描可看任意倍數(shù)。

實(shí)驗(yàn)操作步驟（僅供參考）

1、常規(guī)脫蠟至水（二甲苯I、二甲苯II各15min，然后梯度酒精脫水：100%I、100%II、95%、90%、80%、70%、50%各5min）

2、蒸餾水沖洗3次，每次5min

3、然后置于60℃溫箱用1%甲苯胺藍(lán)染色40 min(或用焦油紫染色30s)

4、蒸餾水洗凈染料后，于分別置于70%，80%和95%以及100%乙醇中脫水，再用二甲苯透明

5、后用中性樹(shù)膠封片。

尼氏染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)