植物過氧-化氫染色液(DAB,pH5.5)

產(chǎn)品簡介：

植物組織在脅迫環(huán)境條件下會產(chǎn)生多種活性氧(ROS)，ROS 活性非常大且極其不穩(wěn)定，因此 ROS 的檢測通常因其最終產(chǎn)物而定。過氧-化氫是活性氧的一種。在過氧-化氫酶的催化下，過氧-化氫能與 DAB(3,3-二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽)迅速反應生成棕紅色化合物，從而定位組織中的過氧-化氫。

操作步驟(僅供參考):

1、試劑準備:將100 mg DAB加入到 100 mL磷酸緩沖液中充分溶解，即得DAB染色工作液，4℃避光保存，一周內(nèi)有效;-20C保存，可適當延長保質(zhì)期。注:DAB對光敏感，溶解過程需要避光，如果較難溶解，可通過超聲、磁力攪拌等方法促溶。

2、樣本準備:采集經(jīng)脅迫(例如重金屬)的植物幼苗或根尖，自來水稍洗凈，置于濾紙上吸干多余的水分。

3、染色:將植物幼苗或根尖浸沒在DAB染色工作染液中，常溫避光染色2~6h，至陽性部位出現(xiàn)深棕色，其余部位近無色或者呈植物本身的顏色即可。(根據(jù)植物幼嫩程度和顯色程度調(diào)整染色時間)

4、脫色:用鑷子將植株幼苗或者葉片小心取出，浸入蒸餾水中來回漂洗3~5次，置于濾紙上吸干多余水分后，浸入95%乙醇中 40℃處理3~16 h，目的是脫去植株幼苗或者葉片本身的葉綠素，脫色期間可多次更換新鮮的95%乙醇.

5、觀察:用鑷子取出植株幼苗或者葉片，浸入蒸餾水中來回漂洗3~5次，置于濾紙上吸干多余水分后，將樣本轉(zhuǎn)入適量 DAB 樣本保存液中浸泡30min，隨后可取出拍照。樣本可置于該保存液中常溫保存一周。

有效期:12個月。低溫運輸，按要求保存。

植物過氧-化氫染色液(DAB,pH5.5)