瘧原蟲染色液(吖淀橙)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

抱子蟲無(wú)明顯運(yùn)動(dòng)細(xì)胞器，全部發(fā)育階段均營(yíng)寄生生活。生活史較復(fù)雜，有無(wú)性的裂體增殖、抱子增殖和有性的配子生殖兩種生殖方式，并可以在同一個(gè)宿主或分別在兩個(gè)不同宿主體內(nèi)完成。寄生于人體的抱子蟲主要有瘧原蟲、剛地弓形蟲、卡氏肺跑子蟲、隱抱子蟲等。

瘧原蟲是營(yíng)寄生生活的抱子蟲，主要寄生于人及多種哺乳動(dòng)物，少數(shù)寄生于鳥類和爬行類動(dòng)物，目前已知有 130 余種。寄生于人體的瘧原蟲主要有間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲、三日瘧原蟲和卵形瘧原蟲等。瘧原蟲的基本結(jié)構(gòu)包括胞核、胞質(zhì)和胞膜，用瑞氏或吉姆薩染色后，胞核呈紫紅色，胞質(zhì)為藍(lán)色。瘧原蟲在人體內(nèi)先后在肝細(xì)胞和紅細(xì)胞內(nèi)發(fā)育，而目其致病是在紅細(xì)胞內(nèi)期裂體增殖時(shí)發(fā)生的。瘧原蟲在紅細(xì)胞內(nèi)發(fā)育包括小滋養(yǎng)體、大滋養(yǎng)體、裂殖體和配子體四個(gè)階段，可通過(guò)瑞氏或吉姆薩染色觀察其不同時(shí)期的不同形態(tài)。

瘧原蟲的病原學(xué)檢查主要分為厚、薄血膜染色鏡檢法和血沉棕黃層定量分析法(QBC)。厚血膜中原蟲比較集中，易檢獲，但制片中紅細(xì)胞容易溶解，原蟲形態(tài)有所改變，蟲種鑒別比較困難;薄血膜中紅細(xì)胞不易被破壞，瘧原蟲形態(tài)結(jié)構(gòu)較完整、典型，容易識(shí)別和鑒別蟲種，但原蟲密度低時(shí)容易漏檢，故常采用一張玻片同時(shí)制作厚、薄兩種血膜，用瑞氏、吉姆薩或吖院橙染色查找瘧原蟲的存在。QBC分析法的原理是由于感染瘧原蟲的紅細(xì)胞比正常紅細(xì)胞輕，而比白細(xì)胞略重，離心分層后，集中分布于正常紅細(xì)胞層的上部，白細(xì)胞層的下部，加入吖院橙試劑后，用熒光顯微鏡觀察結(jié)果，敏感度比普通鏡檢法高很多，更簡(jiǎn)便、快捷，但費(fèi)用較高。

瘧原蟲染色液(吖呢橙染色液)由吖橙和磷酸鹽等組成，主要是采用熒光染料吖院橙進(jìn)行厚薄血膜的染色，通過(guò)滲透、吸附和化合等作用與寄生蟲或組織細(xì)胞的不同成分結(jié)合成為帶熒光的標(biāo)本，再經(jīng)過(guò)熒光光源的激發(fā)，使結(jié)合的熒光素的標(biāo)本發(fā)出熒光，通過(guò)熒光顯微鏡在暗室中觀察瘧原蟲的存在，本法簡(jiǎn)單、快捷，檢出率高于常規(guī)法。該試劑僅用于科研領(lǐng)域不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料：

1、蠟筆、甲醇、去離子水

2、載玻片、熒光顯微鏡、暗室

3、抗熒光淬滅封片劑

操作步驟(僅供參考):

1、制作血膜: 厚血膜比吉姆薩染色的厚血膜略薄，可用 3l 血涂成直徑為 1.2~1.5m 的亞厚血膜;薄血膜則不宜過(guò)薄，可在涂片時(shí)推片以 45°角涂成較厚的薄血膜

2、配制吖橙染色液:0.1ml 吖橙存液加入 9.9ml磷酸鹽緩沖液混合即成，可于 4C保存10~15 天。

3、染色前，先用蠟筆在厚薄血膜間劃一條橫線

4、用 0.5~1ml 甲醇固定薄血膜，清水溶去厚血膜上的血紅蛋白

5、吸取吖橙染色液滴加到血膜上，室溫避光染色 30s~120s，加蓋玻片6、熒光顯微鏡(激發(fā)濾光片波長(zhǎng) 488nm ,阻斷濾光片波長(zhǎng) 515nm) 暗室中觀察數(shù)并拍照不能及時(shí)觀察的可用抗熒光滅封片劑封片，可延緩熒光的淬滅

染色結(jié)果

瘧原蟲和白細(xì)胞的核呈現(xiàn)黃綠色熒光，胞漿呈橘紅色熒光

注意事項(xiàng)

1、涂制血膜用的載玻片使用前需經(jīng)鉻酸洗液處理

2、染色用的血膜厚薄應(yīng)符合要求.

3、吖橙染色液一般建議臨用前稀釋，不宜存放過(guò)久

4、滴加染色液應(yīng)以覆蓋血膜為準(zhǔn)

5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

有效期 :12 個(gè)月有效。常溫運(yùn)輸，4保存。

瘧原蟲染色液(吖淀橙)