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通用名：石典[125I]- 胰島素放射免疫分析藥盒盒

漢語(yǔ)拼音：Dian[125I] Yidaosu Fangshemianyifenxi Yaohe

英文名:Iodine[125I]- Insulin Radioimmunoassay Kit

簡(jiǎn)稱：石典[125I] 胰島素（Ins）放免藥盒

[使用目的]

用于定量測(cè)定人血清或血漿中胰島素（Ins）的濃度。

[用途]

胰島素的測(cè)定主要用于對(duì)糖尿病的分型，即通過(guò)胰島素釋放實(shí)驗(yàn)，區(qū)分糖尿病的類型。另外對(duì)于研究胰島素β細(xì)胞的分泌功能、胰島素瘤的分析、探討冠心病機(jī)理等也有一定的意   義。

[試驗(yàn)原理]

本品采用了第二抗體＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理：含胰島素（Ins）的樣品和 125I 標(biāo)記的胰島素（Ins）與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及

PEG，使免疫復(fù)合物沉淀，離心，測(cè)沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中胰島素（Ins）的濃度。

[試劑主要組成成分]

1、 胰島素標(biāo)準(zhǔn)品：6 瓶，凍干品 A-F，濃度分別為 7、20、40、90、180、350mIU/L，使用時(shí)加 1.0ml 溫育液溶解。

2、質(zhì)控血清：兩瓶，凍干品，使用時(shí)加 0.5ml 蒸餾水溶解。

濃度為： L： H：

3、抗 Insulin 血清： 一瓶，藍(lán)色溶液，2～8℃冷存。

4、125I-Insulin 標(biāo)記物：凍干品 1 瓶，< 88.23 kBq/100T，50 管加 5.5ml，100 管加 11ml，200

管加 22ml 溫育液溶解。

5、分離劑： 一瓶，含二抗血清、PEG 等，充分搖勻后使用，2～8℃冷存。

6、溫育液：一瓶，2～8℃冷存。

[使用前準(zhǔn)備]

試驗(yàn)前，恢復(fù)樣本至室溫，小心搖勻血清樣本。

[實(shí)驗(yàn)方法]

1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫，凍干品按操作要求進(jìn)行溶解,平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作；

2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào)，所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù)；

3、 每個(gè) NSB 管加入 200µl 溫育液，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品“0”管 加入 100µl 溫育液；

4、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品（A~F）、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中；

5、 每管均各加入 100µl 標(biāo)記物工作液；

6、 每管均各加入 100µl 抗體工作液，充分混勻；

7、 37℃溫育 2 小時(shí)；

8、 每管均各加入 500µl 分離劑后，充分混勻；

9、 室溫放置 15 分鐘后，離心 3500 轉(zhuǎn)／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液；

10、 用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定各管計(jì)數(shù) CPM. 檢測(cè)時(shí)間: 1 分鐘；

[實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意]

1、 γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分，效率應(yīng)≥75％；

2、 加入放射性標(biāo)記物時(shí)，應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎，以避免造成放射性污染；

3、 如果某一個(gè)樣本的測(cè)定值高于高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1：2 或 1：

4 的比例稀釋樣本后重新測(cè)試，測(cè)試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

每次實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)至少采用兩個(gè)濃度的質(zhì)控血清進(jìn)行質(zhì)量控制，以確保每次實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果  的可靠性。

1、 質(zhì)控血清的平均值應(yīng)在允許范圍內(nèi)；

2、 曲線方程應(yīng)采用佳擬合方式；

3、 重復(fù)樣本的測(cè)定結(jié)果相差在 15％以內(nèi)。

如不能同時(shí)滿足以上條件，則此次試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效，全部試驗(yàn)需重新進(jìn)行。

[產(chǎn)品性能指標(biāo)]

1、靈敏度：

取藥盒中校準(zhǔn)試劑 0 劑量作 10 平行管，求其均值 X 及偏差 SD，從劑量—反應(yīng)曲線上查出與 X+2SD 相對(duì)應(yīng)的劑量值，確定為本藥盒的靈敏度（小檢出值），為 0.17mIU/L。

2、精密度：

精密度是質(zhì)量控制的基本參數(shù)，用批內(nèi)變異系數(shù)和批間變異系數(shù)確定。要求批內(nèi)變  異系數(shù) < 10% ，批間變異系數(shù) < 15% 。

批內(nèi)變異系數(shù):指不同濃度的三個(gè)樣品C1、C2、C3 同時(shí)分別進(jìn)行多個(gè)復(fù)管一次測(cè)定中的

[規(guī)格] 100 人份／盒

[儲(chǔ)藏]冷凍組份-20℃,冷藏組份 2～8℃。

[有效期] 1 個(gè)月

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