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2016-08-29產(chǎn)品型號:
更新時間:2026-05-07
產(chǎn)品名稱:大鼠皮質(zhì)酮(CORT)ELISA檢測試劑盒
貨號:XFR30985
規(guī)格:48T/96T
儲存條件:2-8℃
有效期:6個月
用途:用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中大鼠皮質(zhì)酮(CORT)的含量。
檢測原理
試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析方法。采用生-物素標(biāo)記CORT,純化的抗CORT抗體包被微孔板,在競爭抑制反應(yīng)中,一定量的固相抗體與生-物素標(biāo)記CORT及非標(biāo)記抗原(校準(zhǔn)品或標(biāo)本)進(jìn)行抑制競爭反應(yīng),抗體與生-物素標(biāo)記的CORT結(jié)合量受非標(biāo)記抗原量所抑制,非標(biāo)記抗原量多,抗體與生-物素標(biāo)記的CORT結(jié)合就少,反之結(jié)合就多;反應(yīng)平衡后,形成固相抗體-生-物素化CORT,再加入酶標(biāo)記的親和素,形成固相抗體-生-物素化CORT-酶標(biāo)-親合素復(fù)合物。經(jīng)加底物顯色后,用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)。隨著CORT濃度的升高,OD值逐漸下降呈良好的線性關(guān)系。本試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、操作簡單、快速等特點(diǎn),對血清中CORT的減少或升高有可靠的檢出性能。
試劑盒性能
1、外觀和物理檢查:試劑盒應(yīng)組分齊全,內(nèi)外包裝均應(yīng)完整,標(biāo)簽清晰,液體試劑無滲漏。各組分裝量不少于表1中要求。
2、線性: 用四參數(shù)Logistic曲線擬合(4-pl),在0.5 ng/mL – 16 ng/mL范圍內(nèi),劑量-反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)(r)的絕對值應(yīng)不低于0.9900。
3、精密度
3.1分析內(nèi)精密度:試劑盒質(zhì)控品測定結(jié)果的變異系數(shù)(CV)應(yīng)不大于15.0%。
3.2批間精密度:在三個不同批次產(chǎn)品之間,質(zhì)控品測定結(jié)果的變異系數(shù)(CV)應(yīng)不大于15.0%
4、最-低檢出限:最-低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
5、質(zhì)控品測定值: 每次檢測結(jié)果均應(yīng)在允許范圍內(nèi)。
樣品收集、處理及保存方法
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注:標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
大鼠皮質(zhì)酮(CORT)ELISA檢測試劑盒